摘要:【目的】 转基因大豆CAL16的抗虫融合蛋白Cry1Ab/Vip3Da对大豆鳞翅目害虫有很好的抗性效果,但目前针对抗虫大豆CAL16及其衍生品种的定性检测的方法尚未建立,本研究旨在根据外源片段插入位置,设计CAL16转化体的特异的定性PCR检测引物,弥补标准上的空白。【方法】 根据技术资料公布的插入位置和载体信息,在左边界(LB端)和右边界(RB端)设计多对引物,分别对引物进行特异性测试、扩增反应优化、测序验证、稳健性测试、灵敏度测试、检出限测试等。【结果】 数据显示,引物组合CAL16-F/R具有很好的特异性和稳健性,检出限为0.10%,符合相关转基因分子检测标准的要求,国内的8家转基因生物安全检测机构能够重复试验结果,因此,该方法可以在检测行业中推广使用。【结论】 转基因抗虫大豆CAL16定性PCR检测方法的建立,为我国CAL16抗虫大豆及其衍生品种的安全监管提供技术支撑。